Multiplex Probe qPCR Mix Plus U

Multiplex Probe qPCR Mix Plus U هو مزيج مركز بمقدار 2X للتفاعل المتسلسل للبوليميراز الكمي في الوقت الفعلي باستخدام طريقة المسبار. عند الاستخدام، ما عليك سوى إضافة قالب الحمض النووي والبادئ والمسبار للتفاعل. يحتوي هذا المنتج على إنزيم Taq DNA Polymerase المعدل بتقنية الأجسام المضادة Hotstart. بالإضافة إلى محلول GDSBio's الخاص لـ PCR في الوقت الفعلي، فإنه لا يمنع فقط تشكل البادئات الثنائية وغيرها من التضخيم غير النوعي، بل يحسن أيضًا كفاءة التضخيم، مما يتيح تفاعل qPCR متعدد المسابير. يقدم هذا الكاشف نظام dUTP/UDG المضاد للتلوث، والذي يمكنه إزالة منتجات PCR التي تحتوي على dUTP قبل تفاعل PCR، ويتجنب بشكل فعال تأثير التلوث المتبادل لمنتجات التضخيم على القياس الكمي. هذا المنتج مناسب للاستخدام مع TaqMan والبادئات لتحقيق مجموعة تشخيص جزيئية Master Mix مسبقة الخلط بالكامل، وهو متوافق تمامًا مع أجهزة PCR الكمية الشائعة، مثل ABI، Roche، Bio-Rad، إلخ. يمكن استخدام هذا المنتج مع TaqMan ومجسات الفلورسنت الأخرى، وهو متوافق تمامًا مع أجهزة PCR الكمية الشائعة، مثل ABI، Roche، Bio-rad، إلخ.

يمكن تحضير نظام التفاعل لهذا المنتج في درجة حرارة الغرفة دون الحاجة إلى صندوق ثلج. يمكن وضع نظام تفاعل PCR المحضر في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة وتبقى كفاءة التضخيم دون تغيير.

التطبيق
تحليل تعبير الجينات بالمسبار
الكشف عن جينات متعددة منخفضة النسخ
التحقق من صحة مصفوفة المجسات
التحقق من صحة تثبيط الجينات بالمسبار

المميزات
هذه المجموعة مناسبة للقياس الكمي للفلورسنت المتعدد بواسطة طريقة المسبار
هذه المجموعة متوافقة مع العديد من أنظمة الوقت الفعلي
توفر تقنية البدء الساخن خصوصية عالية وتضخيمًا قابلاً للتكرار
نظام dUTP/UDG، يمنع بشكل فعال تلوث منتج PCR

يدعم وضع التضخيم السريع: وقت التشغيل <50 دقيقة، فقدان ∆Ct متحكم به.

يتوفر تصنيع المعدات الأصلية (OEM)

اختبار الثبات على سطح المكتب:
باستخدام الحمض النووي الجيني البشري (0.1 نانوغرام/ميكرولتر) كقالب، يتم إجراء الكشف الجيني من خلال Multiplex Probe qPCR Mix Plus U. يوضح الشكلان 1 و2 منحنيات التضخيم المكتشفة بعد تحضير نظام التفاعل (0 ساعة) وبعد وضعه في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) لمدة 48 ساعة (48 ساعة) على التوالي؛ في الوقت نفسه، يتم إجراء اختبار مقارن مع منتج مماثل للمصنع T، مع الشكلين 3 و4 يمثلان منحنيات التضخيم لتجميع المصنع T التي اكتملت في 0 ساعة و 48 ساعة على التوالي. يمكن ملاحظة أنه بعد وضع النظام المجمع مسبقًا في درجة حرارة الغرفة لمدة 48 ساعة، لا يزال Multiplex Probe qPCR Mix Plus U يتمتع بأداء تضخيم ممتاز.

اختبار إزالة التلوث عالي التركيز (نظام qPCR المتعدد):
في نظام تضخيم الفلورسنت الثلاثي (3-Plex)، تم إدخال مكبرات الصوت التي تحتوي على U عمدًا بتخفيف 10⁴ أضعاف (تركيز 100a)، وتخفيف 10⁵ أضعاف (تركيز 10a)، وتخفيف 10⁶ أضعاف (تركيز a) لمحاكاة التلوث المحمول في المختبر. تمت مقارنة أداء P2601 (بدون نظام UDG/dUTP) وجهاً لوجه مع P2701 (هذا المنتج) من حيث مقاومة التلوث. تم إجراء تحكم بدون قالب (NTC) بالتوازي.

النتائج:
P2601 (مجموعة التحكم - لا يوجد نظام مضاد للتلوث): لم يُظهر NTC تضخيمًا. أنتجت القنوات الملوثة (GAPDH / RPLPO / GUSB) إشارات تضخيم قوية عبر جميع تدرجات التخفيف، مما يشير إلى نتائج إيجابية كاذبة شديدة.
P2701 (مجموعة الاختبار - هذا المنتج): بعد هضم لمدة دقيقتين عند 37 درجة مئوية، تم التخلص بفعالية من الإشارات الإيجابية الكاذبة في القنوات الملوثة (أقل من حد الكشف)، مع استعادة منحنيات التضخيم إلى مستويات خط الأساس. تأخرت قيمة Ct للكشف عن RPLPO بشكل ملحوظ (ΔCt ~ 11)، مما يدل على كفاءة إزالة عالية تصل إلى 99.95٪. لم تُظهر قناة NTC أي تضخيم.

اختبار التضخيم السريع:

يدعم Multiplex Probe qPCR Mix Plus U وضع التضخيم السريع، مع وقت تفاعل يقل عن 50 دقيقة، مما يوفر أكثر من 30٪ من الوقت، ومع فقدان Ct يمكن التحكم فيه: حوالي 1-3.5 دورات.

استراتيجية تخصيص الهدف (توصية): في فحوصات PCR المتعددة، قم بتحسين تخصيص القنوات لتعويض خسائر الحركية للدورة السريعة:

قناة ROX: خصص الجينات المستهدفة عالية الوفرة أو عالية التعبير أو غير التابعة لحد الكشف (LoD).

قنوات FAM أو CY5: احتفظ بها للأهداف الهشة أو ذات النسخ المنخفضة جدًا. لا تتأثر هذه القنوات عمليًا بالبروتوكولات السريعة (∆Ct ~1).