One-Step-Sonden-RT-qPCR-Kit V2

Das One-Step Probe RT-qPCR Kit V2 wurde für den quantitativen PCR-Nachweis unter Verwendung von RNA als Vorlage, beispielsweise viraler RNA, entwickelt. Mithilfe genspezifischer Primer (GSP) werden Reverse Transkription und qPCR in einem einzigen Gefäß durchgeführt. Dadurch sind kein zusätzliches Öffnen von Gefäßen und kein zusätzliches Pipettieren erforderlich, was den Probendurchsatz deutlich erhöht und das Kontaminationsrisiko reduziert. Dieses Kit verwendet ein dUTP/UDG-System. Thermolabiler UDG kann bei Raumtemperatur schnell U-haltige Kontaminationen abbauen. Bei der Durchführung der reversen Transkription bei 55 °C wird der thermolabile UDG rasch inaktiviert, ohne die Effizienz und Sensitivität der RT-qPCR zu beeinträchtigen. Eine thermostabile reverse Transkriptase behält bei 55 °C ihre stabile Aktivität bei. Die mit einem Hot-Start-Antikörper modifizierte schnelle DNA-Polymerase und das optimierte Puffersystem gewährleisten die äußerst hohe Sensitivität und Spezifität des One-Step Probe RT-qPCR Kit V2. Das Kit ist als praktischer Master-Mix erhältlich. Der 2X RT-qPCR Mix enthält ein optimiertes Puffersystem sowie einen dNTP/dUTP-Mix und eignet sich für hochspezifische Nachweissysteme mit fluoreszenzmarkierten Sonden wie TaqMan.

Anwendungen
Nachweis von RNA-Viren und Krankheitserregern – z. B. SARS-CoV-2, HIV, Influenza, Dengue, HCV
Quantifizierung der Genexpression – aus RNA-Proben mit geringer Konzentration oder aus wertvollen RNA-Proben
Multiplex-Zielnachweis – gleichzeitiger Nachweis von 4–6 Zielen in einem Gefäß
Direktamplifikation (ohne RNA-Extraktion) – unter Verwendung roher Lysate aus Abstrichen, Blut oder Gewebe
RNA-Vorlagen mit geringer Konzentration und hohem GC-Gehalt – hohe Sensitivität bis hin zu wenigen Kopien oder 0,1 pg Gesamt-RNA

Eigenschaften
Schneller Start, 30-sekündiger Hot-Start
Reverse Transkription bei 55 °C zur Verarbeitung komplexer RNA-Vorlagen
Enthält thermolabilen UDG zur Verringerung falsch-positiver Ergebnisse durch Kontamination
Hohe Sensitivität beim Nachweis gering exprimierter Gene
Hohe Stabilität, unveränderte Leistung bei 4 °C und 37 °C über eine Woche
Das Reaktionssystem kann bis zu 30 Minuten im Voraus angesetzt werden, ohne dass sich die Leistung verändert
Zeitsparend durch Unterstützung schneller Programme