One-Step-Sonden-RT-qPCR-Kit V3

Das One-step Probe RT-qPCR Kit V3 wurde für den quantitativen PCR-Nachweis unter Verwendung von RNA als Vorlage, beispielsweise viraler RNA, entwickelt. Unter Verwendung genspezifischer Primer (GSP) werden Reverse Transkription und qPCR-Reaktionen in einem einzigen Reaktionsgefäß durchgeführt. Dadurch sind kein zusätzliches Öffnen von Gefäßen und kein weiteres Pipettieren erforderlich, was den Probendurchsatz deutlich erhöht und das Kontaminationsrisiko reduziert. Dieses Kit verwendet ein dUTP/UDG-System. Thermolabiles UDG kann bei Raumtemperatur U-haltige Kontaminanten schnell abbauen. Wird die Reverse Transkription bei 55℃ durchgeführt, wird das thermolabile UDG rasch inaktiviert, ohne die Effizienz und Sensitivität der RT-qPCR zu beeinträchtigen. Durch die Kombination der hervorragenden Leistung von Reverse Transkriptase und Hot-Start-Taq-DNA-Polymerase mit dem optimierten Puffersystem erreicht die Nachweisempfindlichkeit des One-step Probe RT-qPCR Kit 0,1 pg Gesamt-RNA oder <10 Kopien der RNA-Vorlage. Das Kit ist als praktischer Master Mix erhältlich. 5X One-step U+ Mix enthält ein optimiertes Puffersystem sowie einen dNTP/dUTP-Mix und eignet sich für hochspezifische Nachweise, niedrige Vorlagenkonzentrationen und Multiplex-Nachweissysteme mit fluoreszenzmarkierten Sonden wie TaqMan. Dieses Produkt ist vollständig mit gängigen quantitativen PCR-Instrumenten wie ABI, Roche, Bio-Rad usw. kompatibel.

Anwendung
Nachweis von RNA-Viren und Krankheitserregern – z. B. SARS-CoV-2, HIV, Influenza, Dengue, HCV
Quantifizierung der Genexpression – aus RNA-Proben mit geringer Konzentration oder aus wertvollen RNA-Proben
Multiplex-Zielnachweis – gleichzeitiger Nachweis von 4–6 Zielen in einem Reaktionsgefäß
Direktamplifikation (keine RNA-Extraktion) – unter Verwendung roher Lysate aus Abstrichen, Blut oder Gewebe
RNA-Vorlagen mit geringer Konzentration und hohem GC-Gehalt – hohe Sensitivität bis hin zu wenigen Kopien oder 0,1 pg Gesamt-RNA

Eigenschaften
Schneller Start, 30 s Hot-Start
Reverse Transkription bei 55℃ zur Anpassung an komplexe RNA-Vorlagen
Enthält thermolabiles UDG zur Reduzierung falsch positiver Ergebnisse durch Kontamination
Hohe Sensitivität beim Nachweis von Genen mit geringer Konzentration
Hohe Stabilität: unveränderte Leistung bei 4℃ und 37℃ über eine Woche
Das Reaktionssystem kann bis zu 30 Minuten im Voraus angesetzt werden, ohne dass sich die Leistung verändert
Zeitsparend durch Unterstützung eines schnellen Programms