Pfu-DNA-Polymerase

Pfu-DNA-Polymerase, gewonnen aus dem hyperthermophilen Archaeon Pyrococcus furiosus, weist im Vergleich zu anderen thermostabilen Polymerasen eine überlegene Thermostabilität und Proofreading-Eigenschaften auf. Ihr Molekulargewicht beträgt 90 kDa. Sie kann DNA-Zielsequenzen von bis zu 2 kb amplifizieren (einfache Vorlage). Die Elongationsgeschwindigkeit beträgt 1 kb/min. Die Pfu-DNA-Polymerase besitzt eine 3'-zu-5'-Exonukleaseaktivität zur Fehlerkorrektur, die es der Polymerase ermöglicht, Fehler beim Einbau von Nukleotiden zu korrigieren. Das bedeutet, dass durch die Pfu-DNA-Polymerase erzeugte PCR-Fragmente weniger Fehler aufweisen als mit Taq erzeugte PCR-Inserts. Die Verwendung der Pfu-DNA-Polymerase in PCR-Reaktionen führt zu PCR-Produkten mit stumpfen Enden, die sich ideal für die Klonierung in Vektoren mit stumpfen Enden eignen. Die Pfu-DNA-Polymerase ist besonders für Verfahren geeignet, die eine hochpräzise DNA-Synthese erfordern.

Anwendung
Hochpräzise PCR- und Primer-Extensionsreaktionen
Hochpräzise PCR zur Klonierung in Vektoren mit stumpfen Enden
Gerichtete Mutagenese

Eigenschaften
10-fach höhere Präzision als Taq
Elongationsgeschwindigkeit: 1 kb/min
Erzeugt stumpfe Enden