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RNase H
RNase H
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Konzentration: 5 U/µL
Produktbeschreibung
Ribonuklease H (RNase H) kann den RNA-Strang innerhalb von RNA-DNA-Hybriden spezifisch abbauen. Dieses Enzym hydrolysiert die Phosphodiesterbindungen in einzelsträngiger oder doppelsträngiger DNA und RNA nicht.
Quelle
E.-coli-Stamm MRE-600.
Definition der Einheit
Eine Einheit ist definiert als die Enzymmenge, die erforderlich ist, um innerhalb von 20 Minuten bei 37 °C die Bildung von 1 nmol säurelöslicher Produkte zu katalysieren.
Die Enzymaktivität wird in folgendem Gemisch bestimmt: 20 mM Tris-HCl (pH 7,8), 40 mM KCl, 8 mM MgCl2,1 mM DTT, 24 µM [3H]-poly(A)·poly(dT), 0,03 mg/mL BSA und 4 % (v/v) Glycerin.
Anwendungsbereiche
- Entfernung von mRNA vor der Synthese des zweiten cDNA-Strangs
- RT-PCR und qRT-PCR: Entfernung von RNA nach der Synthese des ersten cDNA-Strangs
- Entfernung der poly(A)-Sequenz aus mRNA nach der Hybridisierung mit Oligo(dT)
- Ortspezifische Spaltung von RNA
- Untersuchung von Produkten aus Polyadenylierungsreaktionen in vitro
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