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T4-Polynukleotidkinase
T4-Polynukleotidkinase
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T4-Polynukleotidkinase (T4 PNK) katalysiert die Übertragung und den Austausch von Pi von der γ-Position des ATP auf das 5'-Hydroxylende von Polynukleotiden (doppelsträngiger und einzelsträngiger DNA und RNA) sowie von Nukleosid-3'-monophosphat. Die T4-Polynukleotidkinase katalysiert außerdem die Entfernung von 3'-Phosphorylgruppen aus 3'-phosphatbasierten Polynukleotiden, Desoxynukleosid-3'-monophosphat und Desoxynukleosid-3'-diphosphat. Bei Vorhandensein von ADP besitzt T4 PNK eine 5'-Endphosphataseaktivität und katalysiert den Austausch von 5'-P-oligomeren/polymeren Nukleotiden und terminalen 5'-Phosphatgruppen von ATP. Sie eignet sich für die Konstruktion von DNA-Bibliotheken und die Herstellung von Sonden mit terminaler Markierung.
10 U/µL
Anwendung
1. Endmarkierung von DNA oder RNA für Sonden und DNA-Sequenzierung;
2. 5'-Phosphorylierung von DNA/RNA für die anschließende Ligation;
3. Phosphorylierung des 5'-Endes des 3'-phosphorylierten Mononukleotids zur Herstellung des pNp-Substrats für die Addition an das 3'-Ende von DNA oder RNA;
4. Markierung des 5'-Endes von Oligonukleotiden mit einer Phosphatgruppe am 3'-Ende.
Eigenschaften
Phosphorylierung des 5'-Endes von DNA oder RNA für Ligationsreaktionen
Terminale Markierung von DNA oder RNA zur Verwendung als Sonden und für die DNA-Sequenzierung
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