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Taq-DNA-Ligase
Taq-DNA-Ligase
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40U/µL
Taq-DNA-Ligase ist eine hitzebeständige Ligase, die die Bildung von Phosphodiesterbindungen an den 5'-Phosphat- und 3'-Hydroxylenden zweier benachbarter DNA-Stränge katalysiert. Diese Reaktion kann nur stattfinden, wenn die beiden Oligonukleotidketten perfekt mit der komplementären Ziel-DNA gepaart sind und zwischen den beiden Oligonukleotidketten keine Lücke besteht. Daher kann sie zum Nachweis von Einzelnukleotidvarianten verwendet werden. Taq-DNA-Ligase verwendet NAD als Kofaktor. Taq-DNA-Ligase war im Bereich von 37–75°C aktiv.
Quelle
Rekombinanter E.-coli-Stamm mit einem aus Thermus aquaticus HB8 klonierten Ligasegen.
Definition der Einheit
Eine Einheit ist die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 50 % von 1 µg BstEII-Enzym 15 Minuten lang bei 45 °C in einem Gesamtreaktionsvolumen von 50 µl an das 12-Basenpaar-Ende von λ-DNA mit klebrigen Enden zu binden.
Anwendungsbereich
Verwendung der Ligasekettenreaktion (LCR) und der Ligase-Nachweisreaktion (LDR) zum spezifischen Nachweis von Allelen
Einbau phosphorylierter Oligonukleotide während der Primer-Extensionsamplifikation zum Mutationsnachweis
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